Unterschied zwischen HPLC und UPLC

Das Hauptunterschied zwischen HPLC und UPLC ist das die Die HPLC ermöglicht die Analyse von Partikeln mit einer Größe von etwa 5 Mikrometern, während die UPLC viel kleinere Partikel im Bereich von 2 Mikrometern zulässt.

HPLC und UPLC sind beide Flüssigchromatographietechniken, die zur Trennung der Komponenten einer Verbindung nützlich sind. Um den Unterschied zwischen HPLC und UPLC zu kennen, müssen wir zuerst wissen, was HPLC ist. Dies ist darauf zurückzuführen, dass es sich bei UPLC um eine spezielle HPLC-Version handelt, die wir leicht verstehen können, wenn wir wissen, was HPLC ist.

INHALT

1. Übersicht und Schlüsseldifferenz
2. Was ist HPLC?
3. Was ist UPLC?
4. Side-by-Side-Vergleich - HPLC und UPLC in Tabellenform
5. Zusammenfassung

Was ist HPLC??

Der Begriff HPLC steht für High Performance Flüssigkeits-Chromatographie. Es ist eine Technik, mit der wir verschiedene Bestandteile einer Verbindung voneinander trennen können. Es ist auch das am weitesten verbreitete Verfahren zur Identifizierung, Quantifizierung und Trennung von Komponenten eines Gemisches. Außerdem verwendet diese Technik einen hohen Druck, um Lösungsmittel durch die Säule zu drücken. Darüber hinaus liegen die Hauptanwendungen der HPLC in der Biochemie zur Analyse von Bestandteilen einer Verbindung. Es ist ein idealer Weg zur Trennung und Identifizierung von Aminosäuren, Nukleinsäuren, Proteinen, Kohlenwasserstoffen, Pestiziden, Kohlenhydraten, Antibiotika, Steroiden und unzähligen anderen anorganischen Substanzen.

Abbildung 01: HPLC-System in einem Labor

Kurz gesagt ist das Betriebsverfahren der HPLC-Technik wie folgt. Erstens sollten wir die Probe in diskreten kleinen Mengen mit einer Pumpe in den Strom der mobilen Phase einbringen. Der Pumpendruck sollte auf 40 MPa gehalten werden. Dann sickert dieser Strom der mobilen Phase durch die HPLC-Säule. Auch die Komponenten in der Probe durchlaufen die Säule. Ihre Bewegungsgeschwindigkeiten unterscheiden sich jedoch voneinander. Dieser Unterschied entsteht aufgrund der unterschiedlichen Wechselwirkungen zwischen den Probenkomponenten und dem Adsorbens im Inneren der Säule. Wir nennen dieses Adsorbens als stationäre Phase, weil es sich in der Säule befindet (sich nicht bewegt). Zweitens können wir am Ende der Säule die Probe sammeln, die von der Säule eluiert. Dort können wir die Unterschiede in den Retentionszeiten für jede Komponente in der Probe bestimmen.

Was ist UPLC??

Der Begriff UPLC steht für Ultra-Hochleistungs-Flüssigkeitschromatographie. Es ist eine Variante der HPLC, aber die Funktionsweise ist die gleiche. Im Gegensatz zur HPLC können mit dieser Methode jedoch sehr kleine Partikel analysiert werden, z. B. 2 Mikrometer kleine Partikel.

Abbildung 02: Ein UPLC-Gerät

Darüber hinaus bietet es eine schnellere Analyse. Bei dieser Technik verwenden wir einen Pumpendruck von 100 MPa zum Einführen der Probe in die Säule. Dieser hohe Druck bestätigt somit, dass die gesamte Probe in die Säule eingeführt wird. Dies ist daher im Vergleich zur HPLC sehr effizient.

Was ist der Unterschied zwischen HPLC und UPLC?

Der Begriff HPLC steht für High Performance Liquid Chromatography, während der Begriff UPLC für Ultra High Performance Liquid Chromatography steht. Daher ist die UPLC-Technik eine entwickelte HPLC-Version. Somit ist die Funktionsweise für beide Techniken gleich. UPLC ist jedoch im Vergleich zur HPLC effizienter, da sie einen hohen Pumpendruck verwendet. Der Pumpendruck für die HPLC beträgt 40 MPA, für die UPLC 100 MPa. Daher ist dies ein Unterschied zwischen HPLC und UPLC. Der Hauptunterschied zwischen HPLC und UPLC besteht vor allem darin, dass die HPLC die Analyse von Partikeln mit einer Größe von etwa 5 Mikrometern ermöglicht, wohingegen die UPLC viel kleinere Partikel um 2 Mikrometer ermöglicht.

Zusammenfassung - HPLC vs UPLC

UPLC ist eine Form der HPLC. Somit sind die Operationsmethoden gleich. Im Vergleich zu HPLC finden wir in UPLC jedoch einige verbesserte Funktionen. Daher gibt es einige Unterschiede zwischen HPLC und UPLC. Der Hauptunterschied zwischen HPLC und UPLC besteht jedoch darin, dass die HPLC die Analyse von Partikeln mit einer Größe um 5 Mikrometer ermöglicht, während die UPLC viel kleinere Partikel um 2 Mikrometer zulässt.

Referenz:

1. "Hochleistungsflüssigchromatographie". Wikipedia, Wikimedia Foundation, 20. Oktober 2018. Hier verfügbar
2. „UPLC.“ Wikipedia, Wikimedia Foundation, 25. Oktober 2017. Hier verfügbar  

Bildhöflichkeit:

1. ”Hplc” Von Kjaergaard in der Wikipedia auf Englisch (Public Domain) via Commons Wikimedia 
2. "Bild eines UPLC-Geräts" Von Groep29 BFW - Eigene Arbeit, (Public Domain) über Commons Wikimedia